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測定意義TH位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為線粒體復合體六,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉化,調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應稱為TH-2,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。測定原理NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉氫反應不能導致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+還原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,測定375nm光吸收的增加速率,來計算TH-2活性。需自備的儀器和用品可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
轉氫酶-2|試劑盒|
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